3T3 - L1 Эмбриональные фибробласты мышей

Информация о товарах:

Замороженная жидкость: 55% базовая среда + 40% FBS + 5% DMSO

Температура: жидкий азот

Программа культивирования A (по умолчанию)А.Растительная среда: DMEM + 10% NCS + 1% P / S

Условия воспитания:Газовая фаза: воздух, 95%; CO2， 5%, температура: 37°C

Рекомендуемая доля1: 3 - 1: 4

Справочное описаниеКлетки 3T3 - L1 представляют собой непрерывные подтемы 3T3 (swiss мыши), полученные путем клонирования. Когда клетки 3T3 - L1 быстро делятся на полные и ингибируют контакт, клетки 3T3 - L1 переходят через передний жир в жировой образец. В питательной жидкости высокое содержание сыворотки может способствовать накоплению жира в клетках 3T3 - L1.

Возраст (пол)Эмбрион

Тип клеткиСпонтанные вечные биохимические клетки

Класс биобезопасностиБСЛ-1

экспрессия рецептораинсулин, выраженный

ХранительATCC; CL-173 ATCC; CCL-92.1BCRC; 6015

Перевозка и хранение:

Сухой лед транспортирует и восстанавливает жизнеспособные клетки.

(1) 1 мл замороженной трубки упаковки сухого льда транспортировки, после получения 80 градусов холодильника после хранения на ночь в жидкий азот или прямое восстановление, если вы обнаружите, что сухой лед испаряется чистым, крышка замороженной трубки сброшена, повреждена и клетки загрязнены, пожалуйста, немедленно свяжитесь с нами.

(2) T25 Бутылка для восстановления выживших клеток при комнатной температуре отправлена, после получения, в соответствии с методом обработки после приема клетки.

Обработка клеток после приема:

1) После получения клетки, 75% стенки бутылки для дезинфекции алкоголя помещает T25 бутылку в инкубатор 37°C примерно 2 - 3h, если вы обнаружите, что бутылка для культивирования повреждена, жидкостный разлив и клетки загрязнены, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя после фотографирования.

2) Подтвердите состояние клетки под микроскопом 4 или 5X, а также сохраните 2 - 3 фотографии только что полученных клеток (10×, 20×) и фотографию внешнего вида культивирующей бутылки в качестве основы для состояния клетки при получении после продажи.

3) Клетки, прикрепленные к стенке: клетки помещаются 2 - 3h в инкубатор с культурой 37°C, под микроскопом наблюдаются рост клеток и прикрепление к стенке, а некоторые из клеток, прикрепленных к стенке, образуются в результате вибрации и выпадения во время экспресс - доставки. Если плотность роста клеток, наблюдаемых под зеркалом, составляет менее 60%, можно удалить питательную среду, наполненную жидкостью в бутылке для культивирования (если есть клетки, не прикрепленные к стенке, которые нуждаются в центробежной рекуперации, повторной подвеске в оригинальную бутылку для культивирования), добавить новую среду 6 - 8 мл и поместить ее в клетку для культивирования, чтобы продолжить культивирование. Если плотность роста клеток составляет более 70% - 80%, клетки могут быть трансформированы. В процессе передачи клетки, которые выпадают из - за вибрации транспорта, нуждаются в центробежной переработке.

Клеточная обработка:

1) Реанимация замороженных клеток:

Замораживающие трубки, содержащие 1 мл клеточной суспензии, быстро размораживаются и размораживаются в водяной ванне при температуре 37°C, добавляя их в центробежные трубки, содержащие 4 - 6 мл питательной среды. Центрифугирование 3 - 5 мин в условиях 1000RPM, сбрасывание верхней жидкости, питательная среда тяжелых суспензий клеток. Затем клеточную суспензию добавляют в культурную бутылку (или чашку Петри) с 6 - 8 мл питательной среды с культурой 37°C на ночь. На следующий день под микроскопом наблюдался рост и плотность клеток.

2) Клеточная транскрипция: если плотность клеток достигает 80% - 90%, можно проводить культуру транскрипции.

Для клеточной транскрипции стенки можно использовать следующие методы:

1. Выбросить культуру верхней очистки и промыть клетки 1 - 2 раза с помощью PBS, который не содержит ионов кальция и магния.

2. Добавьте 0,25% (w / v) - 0,53 мм EDTA в культурную бутылку (T25 бутылок 1 - 2 мл, T75 бутылок 2 - 3 мл), поместите в инкубатор 37°C для переваривания в течение 1 - 2 минут (трудно перевариваемые клетки могут надлежащим образом продлить время переваривания), затем посмотрите на пищеварение клетки под микроскопом, если большая часть клетки округляется и выпадает, быстро заберите операционный стол, после нескольких ударов по бутылке добавьте 3 - 4 мл питательной среды, содержащей 10% FBS, чтобы прекратить пищеварение.

3. Аккуратно выровнять и высосать, центрифугировать 3 - 5 мин в условиях 1000 RPM, отбросить очищающую жидкость, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после дутья равномерно. Клеточная суспензия делится на новую бутылку T25 в соотношении 1: 2, добавляя 6 - 8 мл новой среды, настроенной в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности роста клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 ~ 1: 5.

3) Замораживание клеток: после получения клетки рекомендуется заморозить партию клеточных семян при культивировании первых трех поколений для последующего экспериментального использования.

Продукция, которую компания продает: