MG63 Клетки остеосаркомы человека

Основные свойства клеток.

Клетки называют:M-G63; MG63； Остеосаркома человека

Род происхождения: человек

Возраст и пол: мужчины;14 лет

Источник ткани: кость; Остеосаркома

Характеристики роста: рост на стенках

Клеточная форма: фибробласт

Справочная информация:Клетки MG - 63 происходят от 14 - летнего белого мужчины с остеосаркомой; Клетки MG - 63 могут вырабатывать высокий уровень интерферона. Клетки MG - 63 экспрессируют TGF - бета - рецепторы I и II.

Класс биобезопасности:1

Спецификации клеток:1 × 106cells / T25 Культурные бутылки или упаковка 1 мл охлаждающей трубки

Обнаружение микоплазмов: нет

Выражение генов:интерферон

Хранитель:ATCC; CRL-1427 ECACC; 86051601; Центр клеточных ресурсов Китайского института фундаментальной медицины

Среда:90% МЭМ + 10% ФБС

Условия культивирования: газовая фаза:95% воздух + 5% углекислыйгаз; Температура: 37°C

Условия замораживания: хранение жидкого азота без сывороточной заморозки

Время удвоения:~ 28-38 часов

STR鉴定位点 Амелогенины: X, Y; CSF1PO: 10, 12; D13S317: 11; D16S539: 11, 12; D18S51: 12, 16; D19S433: 13, 14; D21S 11:30; D2S1338: 17, 24; D3S1358: 15, 20; D5S818: 11, 12; D7S820: 10, 11.1; D8S1179:13; ФГА: 21, 25; TH01: 9,3; ТПОКС: 8, 11; vWA: 16, 19;

II. Функционирование клеточной культуры

1) Реанимационные клетки: следующие клетки культивируют замораживание обработки только для справки, конкретные шаги работы в основном с описанием продукта

Будет содержатьЗамораживающая трубка с 1 мл клеточной суспензией быстро размораживается и размораживается в водяной ванне при температуре 37°C, а 4 мл питательной среды смешиваются равномерно. Центрифугирование в течение 3 мин при 1000 рpm, сбрасывание очищающей жидкости, добавление 1 - 2 мл питательной среды после дутья равномерно. Затем все клеточные суспензии добавляются в бутылки с умеренным количеством питательной среды для культивирования на ночь (или добавляют клеточную суспензию в чашку 6 см, добавляя около 4 мл питательной среды, культивируя ночь). На третий день менять жидкость и проверять плотность клеток.

2) Клеточная транскрипция: если плотность клеток достигает 80% - 90%, можно проводить культуру транскрипции.

a、 Когда клетки растут до 80% площади, покрывающей бутылку, они выбрасывают питательную жидкость из бутылки с культурой 25cm2 и промывают клетки PBS один раз;

b、 Добавьте 0,25% пищеварительной жидкости около 1 мл в бутылку для культивирования, наблюдайте под перевернутым микроскопом, пока клетка не свернется и не округлится, добавьте питательную жидкость, чтобы прекратить пищеварение, а затем мягко вдувайте клетку, чтобы она выпала, а затем переместите суспензию в 15 мл центробежной трубки, 1000 rpm центрифуга 5 мин;

c、 Оставить очищение, осаждающие клетки с 12 мл питательной среды для повторного подвешивания, а затем в пропорции 1: 2 для передачи в бутылке, и, наконец, поместить в 37 ° C, 5% CO2 клеточных инкубаторов для культивирования;

d、 После того, как клетки прикрепляются к стенке, наблюдайте за результатами культивирования, а затем культивируйте или передавайте жидкость.

3) Замораживание клеток: Когда клетки растут в хорошем состоянии, может проводиться замораживание клеток. В качестве примера можно привести следующие бутылки T25;

a、 Когда клетки растут до 80% площади, покрывающей бутылку, они выбрасывают питательную жидкость из бутылки с культурой 25cm2 и промывают клетки PBS один раз;

b、 Добавьте 0,25% пищеварительной жидкости около 1 мл в бутылку для культивирования, наблюдайте под перевернутым микроскопом, ожидая, когда клетка отступит и округлится, добавьте питательную жидкость, чтобы прекратить пищеварение, мягко вдувайте клетку, чтобы она выпала, а затем переместите суспензию в 15 мл центробежной трубки, 1000rpm центрифуга 5 мин;

c、 Перевешивать клетки с соответствующим количеством замороженной жидкости (FBS: DMSO = 9: 1) и помещать их в трубку замораживания;

d、 Сначала трубку для замораживания клеток помещают в - 20°C 1.5h, затем перемещают в - 80°C на ночь, а затем в жидкий азот на 24 часа для длительного хранения. Использовать программную охлаждающую коробку можно непосредственно в - 80°C.

III. Повышение внимания

После получения клетки сначала посмотрите, является ли клеточная бутылка нетронутой, есть ли утечка, мутность и другие явления в питательной жидкости, если это происходит, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя.

2. Внимательно прочитайте инструкции по клеткам, чтобы понять информацию, связанную с клетками, такую как клеточная форма, используемая питательная среда, соотношение сыворотки, требуемые цитокины и т. Д., Чтобы убедиться, что условия культивирования клеток одинаковы, если из - за непоследовательных условий культивирования возникают проблемы с клетками, ответственность лежит на клиенте.

Протрите поверхность клеточной бутылки 75% спиртом и посмотрите состояние клетки под микроскопом. Из - за проблем с транспортировкой, некоторые клетки из - за изменения температуры и интенсивного прикосновения к фрагментации образуют фрагменты, что является нормальным явлением. Наблюдая за клеточным состоянием, 75% стенок бутылок для дезинфекции алкоголя помещают бутылку T25 в инкубатор 37°C на 2 - 4h.

Стенные клетки могут перевариваться, суспензионные клетки непосредственно смешиваются и собирают клетки, 900 rpm - 1000 rpm центрифуг 3 мин, оставляют очищение. Добавьте 5 мл тяжелых висячих клеток PBS, затем 900 rpm - 1000 rpm центрифуг 3 мин., перевешивая клетки свежими питательными средами, и введите их в новую бутылку или чашку Петри и поместите в инкубатор для культивирования.

Клиентам предлагается использовать питательную среду на тех же условиях для культивирования клеток.

6. Рекомендуется, чтобы клиенты делали несколько фотографий клеток в течение первых трех дней после получения клеток, записывали состояние клеток и облегчали общение с техническим отделом нашего отдела. Из - за транспортировки отдельные чувствительные клетки могут испытывать нестабильность, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя, чтобы сообщить конкретную ситуацию с клетками, чтобы наши техники могли отслеживать обратный визит до тех пор, пока проблема не будет решена.

7. Клетка предназначена исключительно для научного использования.

8. Примечание: Транспортные питательные среды (жидкие питательные среды) больше не могут использоваться для выращивания клеток, замените их новыми питательными средами, подготовленными в соответствии с условиями культивирования клеток в инструкции. После получения клеточной передачи рекомендуется 1: 2 передачи.

Примечание: 1: Передача 1: 2 - это одна бутылка T25, передающая две бутылки T25 или две чашки 6cm. Не одна бутылка T25 передает две чашки 10 см

Продукция, которую компания продает: