22RV1 (клетки рака предстательной железы человека)

22RV1 (клетки рака предстательной железы человека)

Не называй. 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; CWR22R

Род человек

Возраст (пол) МужчиныВзрослые,

Источник организации Простаты

Характеристика роста Стенографические клетки

Клеточная форма эпителиальный образец

Справочное описание 22RV1 - это эпителиальная линия рака предстательной железы у людей с гетеротрансплантацией (которая непрерывно передавалась у мышей, у которых кастрация вызвала спад рака предстательной железы и рецидив после прививки от мужского гормона доверия CWR22 их отца); Клеточная линия 22RV1 экспрессирует специфические антигены предстательной железы. Диокситестостерон незначительно стимулирует рост клеток 22RV1, обнаруживая иммунную реакцию растворенных продуктов и антител к антимужским гормональным рецепторам с помощью Western Blot; EGF стимулирует рост клеток 22RV1, но TGF β - 1 не может подавлять рост клеток; 22RV1 может образовывать опухоли у голых крыс.

Класс биобезопасности 2

Растительная среда RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

Рекомендуемая доля 1: 3 - 1: 4

Рекомендуемая частота обмена жидкости 2 - 3 раза в неделю

Время удвоения ~ 40 часов

Условия замораживания

Замороженная жидкость:55% Базовая среда + 40% FBS + 5% DMSO

Температура: жидкий азот

Условия культивирования

Газовая фаза: воздух,95%； CO2, 5%

Температура:37℃

онкогенность Да, формирует опухоли у голых мышей.

экспрессия рецептора андрогенный рецептор

Меры предосторожности Для восстановления клеток 22RV1 требуется центробежное удаление DMSO. На начальном этапе восстановления замороженных клеток, с небольшим количеством наклеек к стенкам, кластерами рыхлых наклеек к стенкам, но в конечном итоге клетки выравниваются и распространяются в хороший монолитный слой, процесс занимает 4 - 5 дней. Клетки растут медленно, и клетки могут расти только до 90% конвергенции. Показатель выживаемости после восстановления после замораживания клеток невелик, рекомендованное соотношение замороженной жидкости составляет 90% сыворотки + 10% DMSO, с использованием высококачественной сыворотки.

Внимание:

1. После получения клетки, если вы обнаружите, что сухой лед испарился чистым, крышка бутылки замороженной трубки выпала, повреждена и клетка загрязнена, пожалуйста, немедленно свяжитесь с нами.

Полученная клетка сначала не открывает крышку бутылки, тело бутылки вытирает алкоголь и помещает его в инкубатор, чтобы статически оставаться в течение 2 - 4 часов (в зависимости от плотности клетки), чтобы стабилизировать состояние клетки. Затем под инвертированным микроскопом наблюдался рост клеток, а клетки фотографировались в различных кратностях (рекомендуется фотографировать общий внешний вид клеток, когда они собираются, чтобы увидеть цвет питательной среды и наличие утечки, а затем под микроскопом - состояние клеток, 100 *, 200 *, по одному), чтобы увидеть, были ли клетки загрязнены во время транспортировки. В качестве основы для осуществления продаж.

3. Поскольку клеточное состояние зависит от многих факторов, таких как окружающая среда, эксплуатация и транспортировка, компания гарантирует только клеточное состояние клиента в течение недели после получения клетки, поэтому клиенту необходимо представить доказательство времени получения клетки после продажи и доказательство времени, предоставленное клиентом для получения и общения с клиентом после обнаружения проблемы, интервал не может превышать 7 дней.

Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать на платформе биобезопасности второго уровня, и обратите внимание на защиту, все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.

Клеточная обработка:

1) Реанимация замороженных клеток: замороженные трубки, содержащие 1 мл клеточной суспензии, быстро размораживаются и размораживаются в водяной ванне при температуре 37°C, добавляются в центробежные трубки, содержащие 4 - 6 мл питательной среды. Центрифугирование 3 - 5 мин в условиях 1000RPM, сбрасывание верхней жидкости, питательная среда тяжелых суспензий клеток. Затем клеточную суспензию добавляют в культурную бутылку (или чашку Петри) с 6 - 8 мл питательной среды с культурой 37°C на ночь. На следующий день под микроскопом наблюдался рост и плотность клеток.

2) Клеточная передача: если плотность клеток достигает 70% - 90%, можно проводить культуру передачи. Клетки представляют собой суспензионные и слегка прикрепленные к стенке клетки, которые могут быть переданы со ссылкой на следующие методы:

Сбор: Сбор взвешенных клеток в бутылке для культивирования в центрифужную трубку. Промыть клетки PBS без ионов кальция и магния 1 - 2 раза. Поскольку клетки плохо прикрепляются к стенкам, клетки после промывки PBS выпадают, поэтому PBS также перерабатывается в центробежные трубки.

2. Добавьте 0,25% (w / v) 0,53 мм EDTA в культурную бутылку (T25 1 - 2 мл, T75 2 - 3 мл), помещенную в инкубатор 37°C для переваривания в течение 1 - 2 минут (трудно перевариваемые клетки могут надлежащим образом продлить время переваривания), затем наблюдайте пищеварение клетки под микроскопом, если большая часть клетки округлится и выпадает быстро обратно на стол, после нескольких ударов по бутылке добавьте 3 - 4 мл питательной среды, содержащей 10% FBS, чтобы прекратить пищеварение.

3. Собранные суспензионные клетки, клетки в очищающем растворе pbs и переваренные клетки стенки в 1000 rpml центрифуг 5 мин, отбросить верхнюю очистку, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после повторной суспензии, чтобы перемешать, клеточная суспензия делится на новую бутылку T25 в соотношении 1: 2, добавить 6 - 8 мл в соответствии с требованиями инструкции конфигурации новой среды для поддержания жизнеспособности роста клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 - 1: 5.

3) Замораживание клеток: после получения клетки рекомендуется заморозить партию клеточных семян при культивировании первых трех поколений для последующего экспериментального использования. Ниже приведен пример T25:

Во время замораживания клетки собирают переваренные клетки в центрифужную трубку в соответствии с процессом клеточной передачи, и для определения плотности замораживания клетки можно использовать счет гемоглобины. Рекомендуемая плотность замерзания для обычных клеток составляет 1×10 ⁶ ~ 1×10 ⁷ живых клеток / мл.

2, 1000rpm центрифуга 3 - 5 мин, удалить выше очистки. Используйте приготовленную клеточную рефрижераторную жидкость для повторной суспензии клеток, в соответствии с 1 мл замороженной жидкости, содержащей 1 × 10 ⁶ ~ 1 × 10 ⁷ живых клеток / мл, выделенных в замороженную трубку, чтобы распределить клетки в замороженную трубку, отметить имя, алгебру, дату и другую информацию.

3) Поместите замороженные клетки в программный охлаждающий бокс и проведите ночь в холодильнике с температурой 80 градусов, а затем переведите в контейнер с жидким азотом для хранения. В то же время для последующего поиска и использования регистрируется местонахождение криогенных труб в контейнерах с жидким азотом.

Этапы работы:

Шаг 1: Извлечь из холодильника непрограммированную замороженную жидкость без сыворотки

Шаг 2: Центробежный сбор клеток логарифмического периода роста (стенные клетки перевариваются центрифугой, суспензионные клетки непосредственно центробежны, скорость 1200 rpm или 250 г, время 3 мин.)

Шаг 3: Бросьте очищение, добавьте соответствующее количество непрограммированной замороженной жидкости без сыворотки, тяжелых суспензий

Шаг 4: В соответствии с количеством 1 ~ 1.5 мл / труб в криогенную трубку, затяните крышку трубки, сделайте маркировку

Шаг 5: Поместите трубку замораживания непосредственно в холодильник с температурой 80°C, а через 24 часа - в жидкий азот для долгосрочного хранения

При отсутствии морозильной камеры или непрограммной заморозки можно выбрать ручной градиент охлаждения. Но ручное градиентное охлаждение не подходит для всех клеток, и эффект нестабилен, и для этого также необходимо сначала пройти тест на замораживание.

Продукция, которую компания продает:

CCRF - CEM (Т - лимфоциты острой лимфоцитарной лейкемии человека)

A9 (клетки подкожной соединительной ткани мышей)

AAV - 293 (зародышевые клетки почек человека)

Acc - 2 (кистозные раковые клетки слюнной железы человека)

ACHN (клетки рака почек человека)

AGS (клетки рака желудочной железы человека)

Ана - 1 (макрофаги мышей)

Anglne (Раковые клетки яичников человека)

AR42J (Экзосекреционные клетки поджелудочной железы крыс)

ARPE - 19 (эпителиальные клетки сетчатки человека)

AsPC - 1 (перенос клеток аденокарциномы поджелудочной железы человеком)

AtT - 20 (клетки гипофиза у мышей)

B16 (клетки меланомы у мышей)

Bcap - 37 (клетки рака молочной железы человека)

BEL - 7402 (клетки рака печени человека)

Коэффициент трилистника свиной кишки(ITF) Набор для тестирования ELISA

Лимфатический яд человекаНабор для обнаружения su β (LTB)

Свиньи, БайцзеSu3 (IL - 3) Набор для тестирования

Металлический белок на основе хомякаmei9 / желатин meiB (MMP - 9 / Gelatinase B) Набор реагентов ELISA

Вирус голубого уха свинейНабор реактивов RT - PCR

Вирус белого осетраРеактор PCR

БоулиновирусНабор для тестирования PCR

НейтрализНабор для тестирования PCR

Стафилококк АрлеттаРеактор PCR

Клеточная плазма общего назначенияРеактор PCR

Генетически модифицированные растенияГенетический тест PAT

22RV1 (клетки рака предстательной железы человека)Стафилококк АрлеттаРеактор PCR

1 (RT - 1) Вирус антилопного герпеса типа 1

ТрипаносомозРеактор PCR

Вирус африканской чумы свинейНабор для тестирования PCR