SK - N - FI Клетки нейробластомы человека

ДоговариваемыйОбновление на04/24

Модель

Природа производителя: Производители

Категория продукта

Место происхождения

Онлайн Консультация

Обзор

Основные свойства клетки $r $n Клеточное название SK - N - FI Человеческая нейробластома Клеточная клетка $r $n Клеточная марка SK - N - FI $r $n Товарный номер XY - H1033 $r $n Родной человек $r $n Источник ткани Мозг $r $n Характеристики роста Стены Рост $r $n Клеточная форма эпителия $r $n Клеточная спецификация 1 # 215; 10 ^ 6cells / T25 Культурные бутылки или упаковка 1 мл охлаждающей трубки

Подробности о продукте

SK - N - FI Клетки нейробластомы человека

Основные свойства клеток.
Название клетки	SK - N - FI Клетки нейробластомы человека
Клетки называются	SK-N-FI
Товарный номер	XY-H1033
Родные источники	человек
Возраст и пол	-
Источник организации	Мозг
Характеристика роста	Стенный рост
Клеточная форма	эпителиальный образец
Справочная информация	-
Класс биобезопасности	-
Клеточные спецификации	1 × 10 ^ 6cells / T25 Культурные бутылки или упаковка 1 мл охлаждающей трубки
Обнаружение микоплазмов	нет
Среда	DMEM+ 0,1 мМ Неэсэнциальные аминокислоты (NEAA) + 10% сыворотки плода говядины (FBS)
Условия культивирования	Газовая фаза:95%воздух+ 5%Углекислый газ; Температура:37℃
Условия замораживания	Хранение жидкого азота без сывороточной заморозки
Время удвоения	~ 24 - 30час

II. После приема клетокОбработка

1)Получив клетку, 75% стенки бутылки для дезинфекции алкоголя помещают бутылку T25 при комнатной температуре около 1 ч. Если вы обнаружите, что бутылка для культивирования повреждена, жидкость переполнена и клетки загрязнены, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя после фотографирования.

2)Пожалуйста, подтвердите состояние клетки под микроскопом 4 или 5X, сохранив 2 - 3 фотографии только что полученных клеток (10 ×, 20 ×) и 2 - 3 фотографии внешнего вида бутылки для культивирования в качестве основы для состояния клетки при получении после продажи.

3)Стенные клетки:Клетки помещаются на 1 ч при комнатной температуре, и под микроскопом наблюдаются рост клеток и их стенки, а некоторые из них сгруппированы в результате вибрации во время экспресс - доставки.Если плотность роста клеток, наблюдаемых под зеркалом, составляет менее 60%, можно удалить питательную среду, наполненную жидкостью в бутылке для культивирования (если есть клетки, не прикрепленные к стенке, которые нуждаются в центробежной переработке, повторной подвеске в оригинальную бутылку для культивирования), добавить новую полную питательную среду таблетки 6 - 8 мл и поместить ее в клетку для культивирования, чтобы продолжить культивирование. Если плотность роста клеток составляет более 70% - 80%, клетки могут быть трансформированы. В процессе передачи клетки, которые выпадают из - за вибрации транспорта, нуждаются в центробежной переработке.

4)Способ удаления клеток во время транспортировки: сбор отслаивающихся клеток после центрифугирования, очистка с помощью PBS, центрифуга, удаление, добавление 1 мл фермента в центрифужную трубку, чтобы сдуть пищеварение около 20 секунд, плюсВаньвесьПосле того, как питательная среда прекращает переваривание, центробежная прокладка заново прокладывается, а оставшиеся клетки, прикрепленные к стенке, работают в соответствии с нормальным методом передачи клеток, прикрепленных к стенке.

5)Примечание: питательная среда для транспортировки (среда для орошения) больше не может использоваться для выращивания клеток, пожалуйста, замените ее на новую, подготовленную в соответствии с условиями культивирования клеток инструкцииВаньвесьКультурная среда для выращивания клеток. После получения клетки рекомендуется первая передача T25 Культурная бутылка 1: 2.

III.тонкийФункция клеточной культуры

1) Реанимационные клетки:Следующие клеточные культуры замораживаются только для справки, конкретные шаги работы в основном с описанием продукта

Будет содержать1 млЗамораживание клеточной суспензии 37Быстрое размораживание в водяной бане, плюс4 млСреда смешивается равномерно. в1000 об/минусловная центрифуга3 минутыВыбросить очищающую жидкость, плюс1-2 млКультивирующая среда после дутья равномерно. Затем добавьте всю клеточную суспензию в бутылку с питательной средой, содержащей соответствующее количество питательной среды, чтобы культивировать ночь (или добавьте клеточную суспензию6 смВ чашке Петри4 млВаньвесьКультивирующая среда, культивирующая ночь). На третий день менять жидкость и проверять плотность клеток.

2) Клеточная передача:Если плотность клеток достигает 80% - 90%, можно проводить культуру передачи.

а)Выбросить культуру очищения, используя ионы без кальция и магнияПБСМоющие клетки1 - 2Восемь пунктов.

b)плюс1 млПищеварительная жидкость (0,25%Трипсин-0,02%ЭДТА) В бутылке с культурой, так что пищеварительный раствор проникает во все клетки, поместить бутылку с культурой37переваривание в инкубаторе1-3 минуты(В зависимости от пищеварения клетки), затем наблюдайте за пищеварением клетки под микроскопом, если большая часть клетки округляется и выпадает, быстро возвращайте консоль, постучите несколько раз в питательную бутылку и добавьте2-3 млВаньвесьКультурная среда прекращает пищеварение.

с)Затем аккуратно уложите его в стерильную центробежную трубку,1000 об/минЦентрифугирование5 минутВыбросить очищающую жидкость, добавить1-2 млКультивирующая жидкость хорошо выдувается.

d)Нажмите клеточную суспензию1: 2Распределение на новые8 млНовая чашка Петри или бутылка питательной среды, помещенная в инкубатор для культивирования.

Сосредоточьтесь на стенных клетках:

лОбязательно.ПБСПомыть еще раз.

лКлетки наблюдают несколько раз больше, чтобы овладеть временем, не прекращая переваривание и не дуя, когда клетка в основном не выпадает, так что клетка Легче дифференцировать и умирать.

лНе надо постоянно бить клетки.

3) Клеточная заморозка:Когда клетки растут в хорошем состоянии, они могут быть заморожены. нижеТПример 25 бутылок;

а)Собирайте клетки и клеточные питательные жидкости в стерильные центрифуги,1000 об/минусловная центрифуга4 минутыВыбросить очищающую жидкость, использоватьПБСОчистить снова, отброситьПБСПроведите подсчет клеток.

b)В зависимости от количества клеток добавьте безсывороточный лимфоцит, чтобы сделать плотность клеток 1х 10^ 6~ 1×10^ 7/ млСлегка перемешайте, каждая криогенная трубка замерзает1 млКлеточная суспензия, обратите внимание на замороженную трубку, чтобы сделать маркировку.

с)Поместить криогенную трубку-80Холодильник,24 часаЗатем он был переведен на хранение жидким азотом. Запишите расположение замороженной трубки, чтобы получить ее в следующий раз.

IV.Воспитание внимания

1)Проблемы возникают в клетках, и они повторяются

а)Различные проблемы, с которыми сталкиваются клетки на пути транспортировки, потеря клеток, повреждение тела бутылки, серьезная утечка питательной жидкости и т. Д. Повторная вспышка;

b)Проблема клеточного загрязнения, пожалуйста, дайте нам реальные экспериментальные результаты в течение 3 дней с момента получения продукта, проверьте и выполните повторную отправку;

с)Через 2 часа после того, как клетка, отправленная при комнатной температуре, остается статичной, через 2 дня после того, как сухой лед заморозил отправленную клетку после восстановления, подавляющее большинство клеток не выжило (необходимо предоставить реальные и четкие фотографии клеточного состояния), повторная отправка;

d)Сухой лед замораживает отправленные клетки через 2 дня после восстановления или при комнатной температуре отправленные клетки статичны в 2 часа и не вскрыты, загрязнение, повторные вспышки;

е)Проблемы с клеточной активностью, пожалуйста, дайте нам реальные экспериментальные результаты в течение 7 дней после получения продукта, используйте метод синего крашения, чтобы определить жизнеспособность клеток, и ежедневные фотографии клеток, после проверки и повторной отправки;

f)В день получения клетки, а также на 2 - 3 - й день, пожалуйста, сфотографируйте, 3 - й день без уведомления, считайте продукт квалифицированным. Возникновение проблем в течение 4 - 7 дней требует предоставления фотографий первых 3 дней получения клетки и фотографий проблем, возникающих в клетке, а также подробных шагов, связанных с операциями, связанными с клеткой, и общения с техническим персоналом, который определяет нашу ответственность за повторную отправку.

2)Проблемы с клетками, которые не воспроизводятся

а)Клиентские операции вызывают клеточное загрязнение и не повторяются;

b)Серьезные ошибки в работе клиента приводят к плохому состоянию клеток, не повторяются;

с)Плохое состояние клеток, не являющихся результатом рекомендованной нами системы клеточной культуры, не повторяется;

d)Клеточное состояние плохое, не дает реалистичных и четких фотографий клеточного состояния за 3 дня до культивирования, не повторяется;

е)Клеточная культура при другой обработке приводит к проблемам с клетками, не повторяется;

f)Получение клеток и выявление проблем в общении с обслуживающим персоналом в течение периода, превышающего 7 дней, без повторной отправки;

g)В зависимости от обстоятельств

V. ПРИМЕЧАНИЯ

1. Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать на платформе биобезопасности второго уровня, и обратите внимание на защиту, и все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.

2. Рекомендуется всегда использовать защитные перчатки, одежду и защитную маску при восстановлении замороженных клеток. Примечание: Замораживающая трубка, погруженная в жидкий азот, просачивается и медленно заполняется жидким азотом. При размораживании жидкий азот превращается в газовую фазу, что может привести к взрыву контейнера или сдуванию его крышки опасной силой, что приведет к образованию летающих обломков, наносящих ущерб людям.

3. Клетка предназначена только для научных исследований! Инструкция только для справки на основе фактического описания прибытия!

Похожий продукт рекомендовать