эпителиальные клетки эндометрия человека

эндометриальный эпителий человека отделяется от тканей матки; Матка - это орган, который размножает плод, расположенный в середине таза, между мочевым пузырем и прямой кишкой, и его положение может варьироваться в зависимости от степени наполнения или положения мочевого пузыря и прямой кишки. Нормальное положение матки в основном поддерживается такими структурами, как связки матки, диафрагма, мочеполовой диафрагма и центральное сухожилие половых органов, которые могут вызвать выпадение матки, когда эти структуры повреждены или ослаблены. Эндометрия - это слизистая оболочка, состоящая из эпителия (однослойный цилиндрический эпителий, два типа секреционных клеток и ресничковых клеток) и внутренней мембраны (состоящей из соединительной ткани, состоящей из большого количества астроцитов, называемых матричными клетками), эндометрия матки может быть разделена на поверхностную функциональную мембрану и глубокий базовый слой, более толстый функциональный слой, составляющий около толщины внутренней мембраны4 / 5; Базовый слой тоньше и плотнее, около 1 / 5, функциональный слой может быть отсоединен, а фундаментный слой не может быть отсоединен. Основные функции эндометриальных эпителиальных клеток: (1) эндометрия, также известная как слизистая оболочка матки, относится к слою, который составляет внутреннюю стенку матки млекопитающих; (2) Эндометрия реагирует как на кинетин, так и на прогестерон, и поэтому может значительно меняться с половым циклом (цикл эмпатии, менструальный цикл). Эндометрия тесно связана с эмбриональной адгезией и занимает важное место в исследованиях репродуктивной физиологии. В процессе « диалога» между эмбрионом и матерью исключительно важную роль играют эндометриальные эпителиальные клетки. Эндометрия представляет собой самый внутренний слой стенки матки женского млекопитающего, расположенный в полости матки и занимающий важное место в репродуктивной физиологии животных. Матка и эндометрия являются важными органами, поддерживающими физиологическую функцию и фертильность самок, а восстановление эндометрия является важной физиологической функцией матки. Эндометриальные эпителиальные клетки, культивируемые вне организма, имеют большое значение для изучения их физиологических функций, действия лекарств и патофизиологических изменений под действием различных патогенных факторов.
Описание методологии:

Лаборатория компании отделяет эндометриальный эпителий человека с использованием метода переваривания коллагеназы, в сочетании со специальной культурой эпителиальных клеток, подготовленной из скрининга, общее количество клеток околоПять на десять? Cells / Бутылка.
Контроль качества:

Эндометриальный эпителий человека, выделенного лабораторией компанииИммунофлюминесцентная идентификация Cytokeratin - 19 с чистотой до 90% и не содержит ВИЧ - 1, HBV, HCV, микоплазмов, бактерий, дрожжей и грибков.

Вся продукция компании предназначена только для научных экспериментов и не используется вне других научных экспериментов!

Условия пакетирования Хвостовой коллагенI (2-5 мкг/см2)

Среда содержащийFBS、 Растительные добавки, пенициллин, Streptomycin и т.д.

Частота обмена жидкости КаждыйСмена жидкости через 2 - 3 дня.

Характеристика роста Стена

Клеточная форма эпителиальный образец

передаточная характеристика А2 - 3 поколения

Пищеварительная жидкость 0.25% ИИпротеаза

Условия культивирования Газовая фаза: воздух,95%； CO2, 5%

Подготовка

1. Подготовка лабораторного оборудования: подготовка стерильной посуды, емкости для культивирования, пипетки для переноса жидкости, центробежных труб, хирургических инструментов и т.д., а также проведение высоковольтной стерилизации или другой соответствующей дезинфекционной обработки.

2. Подготовка реагентов: Приготовьте или купите подходящие питательные среды, пищеварительные ферменты (например, коллагеназы и т. Д.), сыворотку плодного крупного рогатого скота, двойную резистентность и другие реагенты, чтобы обеспечить их стерильность и в течение срока действия.

Подготовка источника подопытных животных или тканей: выбор подходящего животного в соответствии с потребностями эксперимента и проведение соответствующей анестезии или казни, получение необходимой ткани; Или взять ткань из существующей базы образцов тканей.

Отбор и обработка материалов

1. Экстракция материалов: в стерильных условиях быстро удалить целевую ткань, минимизировать повреждение ткани и удалить избыточные жиры, соединительные ткани и другие нецелевые ткани.

2. Очистка: извлеченную ткань несколько раз промывают предварительно охлажденной стерильной PBS для удаления крови и примесей.

3. Вырезание: Стричь ткань на мелкие кусочки примерно 1 - 2 мм³ для последующего переваривания.

Клеточное разделение

1. Пищеварение: измельченные тканевые блоки помещаются в центрифужную трубку, содержащую соответствующее количество пищеварительных ферментов, и в течение некоторого времени перевариваются в термостате или инкубаторе при температуре 37°C. В течение этого периода можно мягко встряхнуть центробежную трубку, чтобы пищеварение было более равномерным.

Прекращение пищеварения: когда большая часть тканевых блоков переваривается в одноклеточную суспензию или мелкие клеточные скопления, добавьте сывороточную питательную среду, чтобы прекратить пищеварение.

Фильтруйте и центрифугируйте: фильтруйте клеточную суспензию клеточным ситом, удаляйте несваренные фрагменты ткани, а затем центрифугируйте фильтр с соответствующей скоростью вращения, чтобы собрать осадки клеток.

Клеточное наблюдение и обнаружение

1. Ежедневное наблюдение: ежедневно с помощью инвертированного микроскопа наблюдаются морфология, состояние роста, плотность клеток и т.д., регистрируются изменения в клетках, такие как обнаружение клеточного загрязнения или аномалий, своевременно принимаются соответствующие меры.
2. Количество клеток и определение их жизнеспособности: при необходимости клетки могут быть подсчитаны и проверены на жизнеспособность с помощью таких методов, как синее крашение, чтобы понять рост и состояние здоровья клеток.

I. Отбор материалов и отделение

1. Быстрая эксплуатация

- Организмы должны быть обработаны сразу после забора материала, чтобы избежать длительного воздействия комнатной температуры или питательной среды.

- Промыть ткани стерильным PBS или физиологическим раствором для удаления крови, примесей.

2. Выбор пищеварительных ферментов

- Выбор пищеварительных ферментов в соответствии с типом ткани, чтобы избежать чрезмерного переваривания, которое приводит к повреждению клеток.

- Время пищеварения требует строгого контроля (обычно 10 - 30 минут), и состояние диссоциации клетки можно наблюдать через микроскоп.

II. Оптимизация условий воспитания

1. Выбор среды

- Используя питательные среды, содержащие сыворотку или специфические факторы роста (например, DMEM, RPMI 1640 и т. Д.), некоторые клетки должны добавлять инсулин, EGF и т. Д.

- Избегайте частой смены марок или партий питательных сред и уменьшайте адаптивный стресс клеток.

2. Стены и преемственность

- Протогенные клетки имеют слабую способность прикрепляться к стенке и могут потребовать упаковки чашки Петри (например, коллаген, полилизин).

- Плотность передачи рекомендуется контролировать на 70% - 80%, а чрезмерное слияние может привести к подавлению контакта и дифференциации.

III. Контроль за загрязнением

1. Асептическая операция

- Полная работа на ультрачистой станции, использование одноразовых расходных материалов, чтобы избежать перекрестного загрязнения.

- В питательную среду может быть добавлен двойной антивирус, но долгосрочное использование может повлиять на активность клеток.

2. Обнаружение микоплазмов

- Регулярно выявлять загрязнение микоплазмом (например, методом PCR), после загрязнения необходимо своевременно выбрасывать клетки.

IV. Мониторинг состояния

1. Ежедневные наблюдения

- Ежедневно проверять клеточную форму, плотность и цвет питательной среды, своевременно заменять питательную среду (как правило, менять жидкость каждые 2 - 3 дня).

- Аномальные формы (например, округление клеток, увеличение фрагментов) могут указывать на загрязнение или недоедание.

2. Передача и замораживание

- Протогенная клетка имеет ограниченное количество делений (обычно 5 - 10 поколений) и требует своевременного замораживания ранних поколений вторичных клеток.

- Замораживающие жидкости рекомендуется использовать сыворотку DMSO + (или специальную замороженную питательную среду), которая сохраняется жидким азотом после охлаждения градиента.