Межпеченочные клетки крыс

Экспериментальный отчет:

I. Разделение и культивирование:

В стерильных условиях удалите ткань предсердия у крыс с СД возрастом 1 - 3D, затем очистите этот блок ткани 2 раза с помощью PBS и разрежьте ткань примерно на 1 мм3;

2. Добавьте 4 мл ферментативного пищеварительного раствора (0,1% и 0,1% коллагеназы типа I) в тканевый блок, перемешайте 10 с, переваривайте 10 мин при 37°C, а затем выдувайте капельницу в одноклеточную суспензию, естественно осаждайтесь и собирайте очищение, с 10% питательной среды FBS, чтобы прекратить переваривание после 4 °C;

3. Оставшаяся ткань добавляется 3 - 4 мл ферментативного пищеварительного раствора, смешивается 10s, после переваривания 37°C 10 мин, в соответствии с вышеуказанным методом сбора очищения и прекращения пищеварения после размещения 4°C, повторяйте этот шаг 2 - 3 раза, пока ткань не переваривается;

4. фильтровать клеточный пищеварительный раствор с помощью сита из нержавеющей стали 200 подкласса, 1200 р / мин центрифуги 10 мин, отбросить верхнюю очистку, осадочные клетки с 10% FBS DMEM / F12 питательной среды, смешанной подвеской, вакцинированной в 25cm2 питательной бутылке, помещенной в 37 ° C, 5% CO2 культивируемой коробки;

5. После дифференциального наклеивания стенки на 1h высасывается питательная среда, которая вводится в соответствии с экспериментальными потребностями в 6 - луночной пластине для продолжения культивирования;ii. иммунофлуоресцентная идентификация:

Когда клетки предсердной мышцы вырастают до 80% слияния, выбрасывайте питательную среду, промывайте клетки теплой PBS 2 раза по 10 мин каждый, а затем закрепляйте клетки 15 мин 4% полиформальдегидом при комнатной температуре;

2. PBS промывает клетки 2 раза по 10 мин каждый, а затем при 4°C с 0,1% проницаемой мембраны Triton X - 100 15 мин;

PBS промывает клетки 2 раза по 10 мин каждый, а затем закрывает клетки на 30 мин 4% BSA при комнатной температуре;

Разбавить альфа - актин - антиген в масштабе 1: 100 и поместить его на ночь в инкубационные клетки в холодильнике при температуре 4°C;

5. PBS промывает клетки 3 раза, по 10 мин каждый, разбавляет анти - альфа - actin дианти в масштабе 1: 150, помещает 1 ч при 37°C;

Промыть 3 раза по 10 минут с помощью PBS, чтобы наблюдать изображение и фотографировать под перевернутым флуоресцентным микроскопом.

Описание клетки:

Печень - это большая железа в организме человека, а также большой основной орган. Интергепатоциты относятся к взрослым стволовым клеткам, и исследования показали, что они могут дифференцироваться к костям, хрящам, сухожилиям, жирам и т. Д. Дифференциация взрослых стволовых клеток к мышечным клеткам делает многие мышцы более дегенеративными и наследственными.

Особенности клеток:

1) Организм происходит из нормальной ткани печени у подопытных животных.

2)Клеточная идентификация:CD44Флуоресцентная окраска положительная.

3)Выявлена более высокая чистота клеток.90%А.

4)Не содержитВИЧ-1АВГБАВГЧА, микоплазма, дрожжей и.

5)Способы роста клеток: длинные челноки, нерегулярные клетки, культивирование стенок.

Рекомендуемые питательные среды:

Мы рекомендуем использоватьДельфИнтергенные вещества Клетки Система воспитания В качестве питательной среды для экстракорпоральной культуры.

Внимание:

После получения клетки сначала посмотрите, является ли клеточная бутылка нетронутой, есть ли утечка, мутность и другие явления в питательной жидкости, если это происходит, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя.

2. Внимательно прочитайте инструкции по клеткам, чтобы понять информацию, связанную с клетками, такую как клеточная форма, используемая питательная среда, соотношение сыворотки, требуемые цитокины и т. Д., Чтобы убедиться, что условия культивирования клеток одинаковы, если из - за непоследовательных условий культивирования возникают проблемы с клетками, ответственность лежит на клиенте.

Протрите поверхность клеточной бутылки 75% спиртом и посмотрите состояние клетки под микроскопом. Из - за транспортных проблем, некоторые клетки из - за изменения температуры и интенсивного столкновения распадаются, чтобы сформировать фрагменты, является нормальным явлением. Наблюдая за клеточным состоянием, 75% стенок бутылок для дезинфекции алкоголя помещают бутылку T25 в инкубатор 37°C на 4 - 6h.

Стенные клетки могут перевариваться, суспензионные клетки непосредственно смешиваются и собирают клетки, 900 rpm - 1000 rpm центрифуг 3 мин, оставляют очищение. Добавьте 5 мл тяжелых висячих клеток PBS, затем 900 rpm - 1000 rpm центрифуг 3 мин., перевешивая клетки свежими * питательными средами, и введите их в новую бутылку или чашку Петри для культивирования в инкубаторе.

Клиентам предлагается использовать питательную среду на тех же условиях для культивирования клеток.

6. Рекомендуется, чтобы клиенты делали несколько фотографий клеток в течение первых трех дней после получения клеток, записывали состояние клеток и облегчали общение с техническим отделом нашего отдела. Из - за транспортировки отдельные чувствительные клетки могут испытывать нестабильность, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя, чтобы сообщить конкретную ситуацию с клетками, чтобы наши техники могли отслеживать обратный визит до тех пор, пока проблема не будет решена.

7. Клетка предназначена исключительно для научного использования.

8. Примечание: Транспортные питательные среды (поливные питательные среды) больше не могут использоваться для культивирования клеток, замените их на новые * питательные среды, подготовленные в соответствии с условиями культивирования клеток в инструкции. После получения клеточной передачи рекомендуется 1: 2 передачи.

Примечание: 1: Передача 1: 2 - это одна бутылка T25, передающая две бутылки T25 или две чашки 6cm. Не одна бутылка T25 передает две чашки 10 см

Продукция, которую компания продает:

Эльнелисакит

Гидрофиниды крыс(OFQ/N) элисаАналитический контрольный комплект

Комплект ELISA OFQ/N

Глобулины морских свинокG(IgG)элизаАналитический контрольный комплект

ИГГЕЛИСАКИТ

флуоресцентные маркеры арахисовых лектинов (ПНА-ФИТКНабор красителей

У крыс свободный бета - хорион(f-бетаCG)элисаНабор для тестирования

Генетически модифицированная кукурузаТК1507Набор для генетического тестирования

Мыши Альфа1Кислотный гликопротеин(а1-АГП)элисаНабор для тестирования

Моллюсковый пролактин(PRL/LTH) элисаАналитический контрольный комплект

PRL/LTH ELISA комплект

Дигидропириминазы человека# 2 (dpysl 2) Иммунодесорбционный тест ферментаАналитический контрольный комплект

Dpysl 2 ализы

аденин - динуклеотид(NADH) элисаНабор для тестирования

Цитопротеаза крыс3(CASP3)элисаНабор для тестирования

Клеточная кислота (ПКНабор для количественного определения общего коэффициента активности

Рецепторы глюкозы человека(MR)элисаАналитический контрольный комплект

МОСПД3Белковые антитела

МОСПД3

1Открытое окно для чтения хромосомы95Антитела

СОРФ95

Коэффициент транскрипцииЕ3 Анти-TFE3

рибосомный связывающий белок1Антитела Анти-RRBP1

Нуклеотин3Антитела Анти-нуклеолярный белок 3/репрессор апоптоза с CARD

3Антитела рецепторов Анти-витамин D рецептор / VDR

Cy5Отмеченный кролик против курицыИГГ H&L

Бета - интерферон у крыс(ИФН-бета/ IFNB)элисаАналитический контрольный комплект

ИФН-бетаКомплект ELISA IFNB

Человеческий ядерный фактор КаппаВИнгибитор - киназы - Альфа(ИКК)аЭлисаАналитический контрольный комплект

Межпеченочные клетки крысГуманикаУбедительно.