эпителиальные клетки крысы

Экспериментальный отчет:

I. Разделение и культивирование:

В стерильных условиях удалите ткань предсердия у крыс с СД возрастом 1 - 3D, затем очистите этот блок ткани 2 раза с помощью PBS и разрежьте ткань примерно на 1 мм3;

2. Добавьте 4 мл ферментативного пищеварительного раствора (0,1% и 0,1% коллагеназы типа I) в тканевый блок, перемешайте 10 с, переваривайте 10 мин при 37°C, а затем выдувайте капельницу в одноклеточную суспензию, естественно осаждайтесь и собирайте очищение, с 10% питательной среды FBS, чтобы прекратить переваривание после 4 °C;

3. Оставшаяся ткань добавляется 3 - 4 мл ферментативного пищеварительного раствора, смешивается 10s, после переваривания 37°C 10 мин, в соответствии с вышеуказанным методом сбора очищения и прекращения пищеварения после размещения 4°C, повторяйте этот шаг 2 - 3 раза, пока ткань не переваривается;

4. фильтровать клеточный пищеварительный раствор с помощью сита из нержавеющей стали 200 подкласса, 1200 р / мин центрифуги 10 мин, отбросить верхнюю очистку, осадочные клетки с 10% FBS DMEM / F12 питательной среды, смешанной подвеской, вакцинированной в 25cm2 питательной бутылке, помещенной в 37 ° C, 5% CO2 культивируемой коробки;

5. После дифференциального наклеивания стенки на 1h высасывается питательная среда, которая вводится в соответствии с экспериментальными потребностями в 6 - луночной пластине для продолжения культивирования;ii. иммунофлуоресцентная идентификация:

Когда клетки предсердной мышцы вырастают до 80% слияния, выбрасывайте питательную среду, промывайте клетки теплой PBS 2 раза по 10 мин каждый, а затем закрепляйте клетки 15 мин 4% полиформальдегидом при комнатной температуре;

2. PBS промывает клетки 2 раза по 10 мин каждый, а затем при 4°C с 0,1% проницаемой мембраны Triton X - 100 15 мин;

PBS промывает клетки 2 раза по 10 мин каждый, а затем закрывает клетки на 30 мин 4% BSA при комнатной температуре;

Разбавить альфа - актин - антиген в масштабе 1: 100 и поместить его на ночь в инкубационные клетки в холодильнике при температуре 4°C;

5. PBS промывает клетки 3 раза, по 10 мин каждый, разбавляет анти - альфа - actin дианти в масштабе 1: 150, помещает 1 ч при 37°C;

Промыть 3 раза по 10 минут с помощью PBS, чтобы наблюдать изображение и фотографировать под перевернутым флуоресцентным микроскопом.

Описание клетки:

склероз - это внешний слой стенки глазного яблока, состоящий из плотного коллагена и эластичного волокна, его структура жесткая и непрозрачная. Передний край склероза соединяется с краем роговицы, а задняя часть продолжается с оболочкой зрительного нерва.

склероз делится изнутри наружно: верхний слой склероза; Основной слой; Нижний слой склероза. Верхний слой состоит из эпителиальных клеток.

Особенности клеток:

1) Организм происходит из нормальной ткани глаз подопытных животных.

2)Клеточная идентификация: роговой белок широкого спектра(ПКК)Флуоресцентная окраска положительная.

3)Выявлена более высокая чистота клеток.90%А.

4)Не содержитВИЧ-1АВГБАВГЧА, микоплазма, дрожжей и.

5)Способ роста клеток: эпителиальные образцы, нерегулярные клетки, культивирование стенок.

Рекомендуемые питательные среды:

Мы рекомендуем использоватьДельфПервобытное поколение Эпителий Клеточная культурная система В качестве питательной среды для экстракорпоральной культуры.

Внимание:

После получения клетки сначала посмотрите, является ли клеточная бутылка нетронутой, есть ли утечка, мутность и другие явления в питательной жидкости, если это происходит, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя.

2. Внимательно прочитайте инструкции по клеткам, чтобы понять информацию, связанную с клетками, такую как клеточная форма, используемая питательная среда, соотношение сыворотки, требуемые цитокины и т. Д., Чтобы убедиться, что условия культивирования клеток одинаковы, если из - за непоследовательных условий культивирования возникают проблемы с клетками, ответственность лежит на клиенте.

Протрите поверхность клеточной бутылки 75% спиртом и посмотрите состояние клетки под микроскопом. Из - за транспортных проблем, некоторые клетки из - за изменения температуры и интенсивного столкновения распадаются, чтобы сформировать фрагменты, является нормальным явлением. Наблюдая за клеточным состоянием, 75% стенок бутылок для дезинфекции алкоголя помещают бутылку T25 в инкубатор 37°C на 4 - 6h.

Стенные клетки могут перевариваться, суспензионные клетки непосредственно смешиваются и собирают клетки, 900 rpm - 1000 rpm центрифуг 3 мин, оставляют очищение. Добавьте 5 мл тяжелых висячих клеток PBS, затем 900 rpm - 1000 rpm центрифуг 3 мин., перевешивая клетки свежими * питательными средами, и введите их в новую бутылку или чашку Петри для культивирования в инкубаторе.

Клиентам предлагается использовать питательную среду на тех же условиях для культивирования клеток.

6. Рекомендуется, чтобы клиенты делали несколько фотографий клеток в течение первых трех дней после получения клеток, записывали состояние клеток и облегчали общение с техническим отделом нашего отдела. Из - за транспортировки отдельные чувствительные клетки могут испытывать нестабильность, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя, чтобы сообщить конкретную ситуацию с клетками, чтобы наши техники могли отслеживать обратный визит до тех пор, пока проблема не будет решена.

7. Клетка предназначена исключительно для научного использования.

8. Примечание: Транспортные питательные среды (поливные питательные среды) больше не могут использоваться для культивирования клеток, замените их на новые * питательные среды, подготовленные в соответствии с условиями культивирования клеток в инструкции. После получения клеточной передачи рекомендуется 1: 2 передачи.

Примечание: 1: Передача 1: 2 - это одна бутылка T25, передающая две бутылки T25 или две чашки 6cm. Не одна бутылка T25 передает две чашки 10 см

Продукция, которую компания продает:

Белки, связывающие жирные кислоты кишечника крыс(iFABP) элисаНабор для тестирования

Реакторы для анализа ацетилирования

Белые мезоиды у мышей4(ИЛ-4)элизаАналитический контрольный комплект

Антицинковая кислота (МДХАР) Испытательная коробка

КлеткиCYP2B1флуоресцентный набор для определения экспрессии белков

Очищенные лизосомы, нейтральные наборы для обнаружения красного цвета.

大鼠整合素α6(ИТГ)а6)ЭлизаНабор для тестирования

Ущерб (Сальмонелла ТифиНабор качественных генетических тестов

Ингибиторы бета - амидазы у мышей(BLI) элисаНабор для тестирования бесплатно

БТБ/ПОЗСтруктурные доменные белки19АнтителаБТБД19

CD43Моноклональные антителаCD43

Рецепторы натриевых пептидовСМоноклональные антителаНатриуретический рецептор пептида С

ФосфорилированиеИнвалиды 1АнтителаФосфо-Даб1 (Сер491)

γ-Глинилтранспептидаза2Антитела тяжелой цепиТяжелая цепочка GGT2

Белая среда1Рецепторы1АнтителаИл-1Р1

ЦитохромP450 2C18АнтителаCYP2C18

Ингибиторы цитокинозависимых киназ2САнтителаCDKN2C/p18 INK4c

ЛКальциевый канальный белока1Подтип6АнтителаCACH6/Cav2.3

МСИ2Белковые антителаМСИ2

Моноклональные антителачеловеческий фибриноген

Семейный белок растворителя38членА8АнтителаSLC38A9

Яблочный якорный белок1АнтителаANKMY1

Остеоморфные белки9АнтителаБМП9

Фактор созревания липазы1АнтителаLMF1

Циклинозависимые киназы8АнтителаCDK8

Циклы дрожжевых клетокМЭтап (СИНХРОНИЯОбработка комплектов реагентов

КИА1614Белковые антитела

КИА1614

АТП5ЕБелковые антитела

эпителиальные клетки крысыАТП5Е