Системный эксперимент CRISPR / Cas12b

ДоговариваемыйОбновление на03/04

Модель

Природа производителя: Производители

Категория продукта

Место происхождения

Онлайн Консультация

Обзор

Системный эксперимент CRISPR / Cas12b: CRISPR / Cas12b, ранее известный как C2c1, относится к системе CRISPR типа V - B Class 2 Type и является важным инструментом редактирования генов после Cas9 и Cas12a.

Подробности о продукте

Молекулярный механизм и структурные характеристики

(i) Определения и классификации систем

CRISPR/Cas12b(Первоначальное названиеC2c1) ПринадлежностьКласс 2 Type V - B CRISPRЭто важный инструмент редактирования генов после Cas9 и Cas12a. Его основные характеристики включают:

Двойной механизм наведения РНКА.

ПотребностиcrРНКАтракрРНК(Может быть интегрирована в sgRNA) Совместная целевая резка, которая сочетает в себе некоторые характеристики Cas9 и Cas12a.

Режим резкиА.

ЕдиныйДомен структуры RuvCВырезать двухцепочечную ДНК, чтобы сформироватьВязкая конечность 5 - 6nt(5 'выделяется), благоприятствует гомологичному рекомбинантному восстановлению (HDR).

Идентификация PAMА.

ЗависимостьСерия T - rich PAM(Например, 5 '- TTN - 3') расширяет возможности редактирования AT - обогащенного генома.

(2) Структурные преимущества

характеристика	Кас12б	Сравнение с Cas9 / Cas12a
Размер белка	Около 1100 аминокислот(Минимальная)	Меньше, чем Cas9 (1600 aa) и Cas12a (1300 aa)
Потребности РНК	Требуется crРНК + tracrРНК (может быть интегрирована в sgRNA)	Более сложный, чем Cas12a (требуется только crRNA), но более простой, чем Cas9
Теплоустойчивость	Температурная чувствительность(Активация 40–55 °C)	Требуются инженерные модификации для адаптации клеток млекопитающих.

II. Технические преимущества и производительность

(i) Основные преимущества

Низкий показатель промахаА.

Обнаружение GUIDE - Seq показывает скорость промахаЭто значительно меньше, чем Cas9.(Ошибка вставки / отсутствие уменьшено > 50%).

Высокая специфичностьА.

Направляющая последовательность crRNA длиннее (> 42 nt), а точность мишени выше.

Режим редактированияА.

ИндукцияНизкая частота мутаций при чистой вставкеБолее склонны создавать небольшие фрагменты отсутствующих и уменьшать функциональную непредсказуемость.

Адаптивность вирусного вектораА.

Мелкие молекулы легче упаковать.AAV или медленный носитель вирусаПовышение эффективности внутренней доставки.

(ii) Сравнение с аналогичными системами

параметр	Кас12б	Кас9	Кас12а
Серия PAM	5 '- TTN - 3' (T - обогащение)	5 "- NGG - 3" (обогащение G)	5 '- TTTV - 3' (T - обогащение)
Конец резания	黏性末端（5' 突出）	плоский конец	黏性末端（5' 突出）
Активность обратной резки	❌ нет	❌ нет	✅ Есть (можно разрезать SSDNA)
Многогенное редактирование	Требуется много SgRNA	Требуется много SgRNA	✅ Поддержка криРНК - массивов

примечание: Режим резки Cas12b делает его вГенная терапияИзбегайте создания новых поверхностей и снижайте риск иммунизации.

Сценарии применения и передовые случаи

(i) Применение биомедицины

Антивирусная терапияА.

ВИЧ:: Одноразовое редактирование в Т - клетках устраняет весь инфекционный ВИЧ и более эффективно, чем Cas9.

Восстановление генетических заболеванийА.

Совместная реализация HDRТочное восстановление гена бета - средиземноморской анемииПри этом гемоглобин возвращается к нормальному уровню.

Онкологический иммунитетА.

РедактированиеPD - 1 / CTLA - 4 Двойная мишеньСнижает истощение CAR - T - клеток.

Похожий продукт рекомендовать