Животные модели Talens

ДоговариваемыйОбновление на03/04

Модель

Природа производителя: Производители

Категория продукта

Место происхождения

Онлайн Консультация

Обзор

Модель Talens - это экспериментальная модель животных, построенная с использованием технологии редактирования генов Talens. Благодаря слиянию транскрипционного активационного активационного факторного эффекта (TALE) ДНК, связывающего структурные домены с срезанными структурными доменами нуклеотидной кислоты (FokI), TALEN способен специфически идентифицировать и вырезать целевые последовательности ДНК для достижения точного редактирования генома.

Подробности о продукте

Животные модели Talens

Принципы технологии TALENS и основные прорывы

(i) Структурный дизайн и механизм действия

TALEN (Transcription Activator - Like Effector Nucleases) - транскрипция ядерного оружия.Инженерная нуклеазаОн состоит из двух частей:

Зоны распознавания ДНК (TALE - белки)А.

от34 Повторяющиеся аминокислоты.Состав, каждый модуль проходитПеременные аминокислоты (RVDs) 12 - го и 13 - го разрядовСпецифика распознавания отдельных оснований:

Тип RVD	Идентификация оснований	Интенсивность сцепления
НИ	А	Высокая специфичность
НГ	Т	Высокая специфичность
HD	С	Высокая специфичность
НН	Г/А	Перекрестная идентификация

Длина идентификационной последовательности обычно15-20 bpУбедитесь, что мишень wei - situ.

Область резания ДНК (нуклеаза FokI)А.

Необходимо формироватьДимерЧтобы вырезать ДНК, TALEN требует парной конструкции (левая правая рука), где место резки находится между двумя руками (интервал обычно составляет 12 - 20 bp).

(2) Механизмы редактирования генов

Двухцепочечный разрыв (DSB)А.

TALE сочетает в себе целевую последовательность → димеризацию FokI → вырезание двойной цепи ДНК.

Путь восстановленияА.

Негомологичное конечное соединение (NHEJ):: Случайная вставка / отсутствие (Indels), что приводит к выбиванию генов.
Гетерогенное направленное восстановление (HDR):: Необходимо предоставить шаблоны для восстановления внешнего источника для достижения точной вставки или точечной мутации.

Технологический прорыв: shu РеализацияПроизвольные геномные участкиТочная резка, и скорость промаха ниже, чем ранняя технология ZFN.

II.Животные модели TalensСтроить процесс

(i) Стандартизированные оперативные этапы

(2) Ключевая технологическая оптимизация

шаг	Основные операции	Новаторские программы
Проектирование мишеней	Избегайте повторяющихся последовательностей / областей метилирования, оптимизируйте интервалы до 14 - 18 bp	Прогнозирование программного обеспечения (TALEN Targeter) повышает успешность
Модульная сборка	Клонирование Golden GateА.

6 Модульные последовательные соединения (+ 63 архитектуры)
Ферментно - разрезное соединение (BsaI / BsmBI). Построение за 6 дней, повышение эффективности в 5 раз.
Аноситель выраженияДвойной инициирующий субвектор млекопитающих (CMV / T7), поддерживающий клеточную транскрипцию и синтез мРНК. Подходит для многовидовых применений (зебры, мыши, человеческие iPS - клетки).
АПроверка активностиДрожжевые однокорпусные гибридные системы или клетки сообщают о генетическом тестировании.
АПередача эмбрионовМикроскопические инъекции оплодотворенных яиц:
mRNA: продукты транскрипции Talens in vitro
RNP - комплекс: протеиновый комплекс TALE - Foki

Похожий продукт рекомендовать